Pipetten sind eine Art von Laborausrüstung, die verwendet wird, um sehr kleine Flüssigkeitsvolumina zu messen und zu übertragen. Genauigkeit und Genauigkeit bei der Pipettenmessung sind notwendig, da jede Diskrepanz bei den abgegebenen Volumina die Ergebnisse eines Experiments beeinflussen kann. Um die Genauigkeit zu gewährleisten, muss die Kalibrierung der Pipette alle paar Monate überprüft werden. Der Kalibrierungsprozess hilft zu überprüfen, ob das Gerät die richtigen Volumina abgibt oder nicht, so dass es repariert werden kann, wenn dies nicht der Fall ist.

Teil eins von zwei:
Überprüfung der Kalibrierung

  1. 1 Sammeln Sie die notwendigen Materialien. Um die Kalibrierung einer Pipette zu überprüfen, benötigen Sie die Pipette, Pipettenspitzen, destilliertes Wasser, einen Becher, ein Thermometer, eine Waage und Boote wiegen. Die Waage muss mikrogrammspezifisch sein, um Mikropipetten mit maximal 1 μL zu kalibrieren.[1]
    • Sie brauchen nicht mehr als 5 ml Wasser. Fülle den Becher mit Wasser.
    • Stellen Sie sicher, dass die Pipettenspitzen die richtigen Pipettenspitzen sind.
  2. 2 Messen Sie die Temperatur des destillierten Wassers. Stellen Sie das Thermometer in das Wasser und lassen Sie es mindestens eine Minute lang stehen. Wenn sich die rote Linie am Thermometer noch bewegt, lassen Sie sie eine weitere Minute lang stehen. Notieren Sie nach einer Minute die Temperatur in einem Notebook. Entferne das Thermometer und trockne es ab, wenn du fertig bist.[2]
    • Die Kenntnis der Wassertemperatur ist wichtig für die Berechnungen, die durchgeführt werden, um die Kalibrierung zu überprüfen.
  3. 3 Stellen Sie das Wiegeboot auf die Waage und löschen Sie es aus. Idealerweise verwenden Sie eine Waage, die Türen hat und eine isolierte Kammer ist. Legen Sie das Wiegeboot in die Kammer und schließen Sie die Türen. Wenn Sie keine Türen haben, legen Sie einfach das Wiegeboot auf die Waage. Drücken Sie die Taste "Zero" oder "Tare" und warten Sie, bis die Waage Null anzeigt.[3]
    • Wenn Sie die Waage auf Null stellen, wird das Gewicht des Plastikbootes abgezogen und Sie können nur das Gewicht von allem, was Sie ins Boot legen, messen.
  4. 4 Bereiten Sie die Pipette für die Kalibrierung vor. Wischen Sie die Pipette mit Ethanol ab, um Verunreinigungen vor dem Beginn zu entfernen, und stellen Sie sicher, dass nichts das Pipettenspitzenende verstopft. Setzen Sie die entsprechende Spitze auf das Ende und stellen Sie die Lautstärke ein, die Sie testen möchten.[4]
    • Zur Kalibrierung testen Sie sowohl das kleinste Volumen als auch das größte Volumen, das die Pipette ausgeben kann.[5]
  5. 5 Spülen Sie die Spitze vor der Kalibrierung vor. Drücken Sie den Knopf bis zum ersten Anschlag und stecken Sie die Spitze in das destillierte Wasser, so dass etwa 2 mm in die Flüssigkeit eingetaucht werden. Lassen Sie die Taste los, um etwas Flüssigkeit anzusaugen, und geben Sie die Flüssigkeit dann durch Drücken der Taste wieder ab. Wiederholen Sie dies dreimal, um die Spitze vorzuspülen.[6]
    • Drücken Sie den Knopf bis zum zweiten Stop, um die in der Spitze verbliebene Flüssigkeit auszugeben und entfernen Sie die Pipette aus dem Wasser.
  6. 6 Saugen Sie das Kalibrierungsvolumen ab. Mit der Spitze aus der Flüssigkeit drücken Sie den Knopf bis zum ersten Stopp. Etwa 2 mm der Spitze in das destillierte Wasser geben und den Knopf loslassen, um die Flüssigkeit in die Spitze zu saugen. Warten Sie etwa 1 Sekunde, bevor Sie die Spitze aus dem Wasser nehmen.[7]
    • Stellen Sie sicher, dass die Spitze während des gesamten Aspirationsprozesses vollständig eingetaucht ist. Sie möchten keine Blasen in der Spitze oder die Ergebnisse werden falsch sein.
  7. 7 Geben Sie die Flüssigkeit in das Wiegeboot auf der Waage. Legen Sie die Spitze gegen den Boden des Wiegebootes und drücken Sie den Knopf bis zum ersten Anschlag. Gehe zu einer anderen Stelle etwas vom Wasser weg und drücke den Knopf bis zum zweiten Stopp. Halten Sie den Knopf gedrückt und heben Sie die Spitze vom Wiegeboot ab.[8]
    • Bewahren Sie die Spitze der Pipette auf, da Sie sie erneut zum Abwiegen weiterer Kalibrierungstests verwenden. Stellen Sie sicher, dass die Spitze nichts berührt.
  8. 8 Notieren Sie das Gewicht auf der Waage. Schließen Sie die Tür, wenn Sie eine Kammerwaage verwenden. Warten Sie, bis sich die Zahlen nicht mehr ändern. Notieren Sie diese Nummer in Ihrem Notebook.[9]
    • Es ist wichtig zu warten, bis sich die Zahl stabilisiert hat, bevor Sie sie aufnehmen. Ihre Messwerte sind falsch, wenn Sie nicht warten.
  9. 9 Wiederholen Sie diesen Vorgang, um mindestens 10 Messwerte zu erhalten. Stellen Sie die Waage auf Null, spülen Sie die Spitze vor, aspirieren Sie das gleiche Volumen, geben Sie das Volumen ab und notieren Sie das Gewicht. Sie möchten mehrere Aufnahmen desselben Volumens haben und dann können Sie sie alle zusammen berechnen.[10]
    • Sie können denselben Prozess mit unterschiedlichen Volumina wiederholen, solange Sie mehrere Messungen pro Volumen durchführen.

Teil zwei von zwei:
Berechnung der Ergebnisse

  1. 1 Definieren Sie die Formel für das berechnete Volumen. Die Formel zur Berechnung des von der Pipette abgegebenen Volumens ist V = w * Z, wobei w das Gewicht des Wassers ist, Z der Umrechnungsfaktor ist, der auf der Dichte des Wassers basiert, und V das berechnete Volumen ist, wie viel Wasser ausgegeben wurde .
    • Sie können die Z-Variable finden, indem Sie die Dichte des Wassers anhand der zu Beginn des Experiments aufgezeichneten Temperatur nachschlagen.[11]
    • Zum Beispiel: Wenn die Temperatur des Wassers 23 ° C betrug, verwenden Sie einen Z-Wert von 1.0035 μg / mg.
  2. 2 Durchschnitt die Replikate zusammen. Sie sollten das Volumen des von der Pipette abgegebenen Wassers mindestens 10 Mal gewogen haben. Um alle diese Werte zusammen zu berechnen, addieren Sie sie alle und dividieren Sie durch 10. Wenn Sie mehr oder weniger Versuche gemacht haben, addieren Sie jeden Versuch und teilen Sie durch die Gesamtanzahl der Versuche.
    • Zum Beispiel: Die zehn Gewichte, die Sie für ein Pipettenvolumen von 10 μl aufgenommen haben, lauten wie folgt: 9.89, 10.01, 10.02, 9.99, 9.95, 10.04, 9.96, 10.01, 9.99 und 9.98.
    • Der Durchschnitt ist: (9,89 + 10,01 + 10,02 + 9,99 + 9,95 + 10,04 + 9,96 + 10,01 + 9,99 + 9,98) / 10 = 99,84 / 10 = 9,984
  3. 3 Stecken Sie die Variablen in die Gleichung und lösen Sie sie. Sobald Sie die richtigen Zahlen für jede Variable ermittelt haben, können Sie sie in die Gleichung einfügen und nach dem berechneten Volumen auflösen. Zum Lösen multiplizieren Sie einfach das Durchschnittsgewicht aller Versuche mit dem Z-Wert.
    • Zum Beispiel: V = w * Z = 9,984 * 1,0035 = 10,019
  4. 4 Berechnen Sie die Genauigkeit der Pipette. Um die Genauigkeit zu berechnen, können Sie die Gleichung A = 100 x V verwendenDurchschn/ V0, wo A ist die Genauigkeit der Pipette, VDurchschn ist das durchschnittliche berechnete Volumen und V0 ist der Wert, den Sie festlegen, dass die Pipette ausgibt. Die Genauigkeit sollte zwischen 99-101% liegen.[12]
    • Wenn die Pipette richtig kalibriert ist, sollte der berechnete Wert sehr nahe an dem tatsächlichen Wert liegen, den Sie an der Pipette eingestellt haben.
    • Zum Beispiel: A = 100 x VDurchschn/ V0 = 100 x 10,019 / 10 = 100 x 1,0019 = 100,19%
    • Diese spezielle Pipette ist richtig kalibriert.
  5. 5 Senden Sie die Pipette zur Kalibrierung, falls erforderlich. Wenn Ihre Pipette den Kalibrierungstest nicht besteht, sollten Sie sie sofort für die Experimente verwenden. Pipetten sind sehr empfindliche und teure Laborgeräte. Sie können die Kalibrierung nicht selbst durchführen, daher müssen Sie sie zur ordnungsgemäßen Wartung einsenden. Alternativ kommen einige Firmen zu Ihrem Labor und kalibrieren dort Ihre Pipetten.[13]
    • Wenden Sie sich an das Unternehmen, das Ihre spezielle Pipettenmarke für Wartungsarbeiten herstellt.