In der Chemie ist die Dünnschichtchromatographie (TLC) ein kostengünstiger, schneller und effizienter Weg, um ein Gemisch für analytische Zwecke in seine Bestandteile zu zerlegen. Die Chromatographie verwendet eine stationäre Phase (üblicherweise Siliciumdioxid, Aluminiumoxid) und eine mobile Lösungsmittelphase, um Verbindungen zu trennen. Im Fall von TLC werden Glasplatten mit Siliciumdioxid beschichtet und dann wird Lösungsmittel darüber fließen gelassen, was eine Trennung von Verbindungen erzeugt. Bei Laborarbeiten kann diese Methode helfen, die Reinheit von Proben zu bestimmen und den Fortschritt einer Reaktion zu überwachen. TLC ist eine gängige Technik, die in Chemielabors gelehrt wird, aber viele Leute haben damit zu kämpfen. TLC wird fast immer in modernen chemischen Forschungslaboren verwendet, daher ist es wichtig, dass die Menschen verstehen, wie man es richtig macht.

Schritte

  1. 1 Schneiden Sie eine große DC-Platte aus dem Karton in Rechtecke. Wahrscheinlich benötigen Sie einen Glasschneider, es sei denn, die Platten sind bereits vorgekerbt. Die DC-Platte hat zwei Seiten. Eine Silica-Seite und eine Glasseite. Die Glasseite ist nur glattes reflektierendes Glas und die Silica-Seite ist eine pulvrige weiße Substanz, die abplatzen wird, wenn Sie sie stören. Seien Sie also vorsichtig beim Umgang mit diesen Platten, um das Kieselgel nicht zu zerstören. Das Berühren der Kieselsäure mit den Fingern sollte vermieden werden!
    • Messen Sie die Abmessungen für Ihre 1,5 x 4 cm Platten oder größer, wenn Sie mehr Platz benötigen, aber diese Größe ist in der Regel ausreichend. Dann werten Sie die Glasseite, nicht die Silica-Seite, leicht mit der Klinge oder dem Glasschneider. Es sollte wie das Bild oben aussehen, mit deutlichen Einschnitten im Glas. Nehmen Sie nun vorsichtig die Platte auf und brechen Sie sie, indem Sie sie mit den Händen von sich weg biegen. Das Glas bricht leicht an einer glatten Kante, wenn es gekerbt wird. Sei sehr vorsichtig, aber du musst genug Kraft anwenden, um das Glas zu brechen. Dies kann einige Übung erfordern, wenn Sie es noch nie zuvor getan haben.
  2. 2 Markieren Sie die DC-Platte. Zeichnen Sie eine Linie in Bleistift etwa 0,5 cm von der Unterseite gerade über. Wenn Sie eine einfache Reaktion, wie in den meisten Bachelor-Labors tun, zeichnen drei gleichmäßig verteilt vertikale Striche auf der horizontalen Linie. Beschriften Sie diese Linien als Ausgangsmaterial (SM), Co-Spot (C) und Reaktion (R). Dies wird in späteren Schritten näher erläutert.
    • Verwenden Sie nur Bleistift, um auf die TLC zu schreiben. Wenn Sie einen Stift oder Marker verwenden, ruiniert Ihre DC-Platte, weil diese Medien Farbstoffe enthalten, die organische Verbindungen sind, die sich zusammen mit Ihren interessierenden Verbindungen entwickeln. Graphit bewegt sich nicht mit dem Lösungsmittel. Schreiben Sie sehr vorsichtig, sonst kratzen Sie die Kieselsäure ab.
  3. 3 Bereiten Sie Ihr Chromatographie-Lösungsmittel vor. Ein klassisches Lösungsmittelsystem ist Ethylacetat und Hexan, da sie sich leicht mischen und die Polarität des Lösungsmittels leicht eingestellt werden kann. Ein guter Ausgangspunkt ist 20% Ethylacetat in Hexan, was einer 1: 4-Lösung von Ethylacetat zu Hexan entspricht. Sie können 1 ml Ethylacetat und 4 ml Hexan in einem Messzylinder oder einem anderen Flüssigkeitsmessgerät leicht ausmessen und dann kombinieren, um die gewünschte Lösung zu erhalten. In ein geschlossenes Gefäß geben Sie 1: 4 Ethylacetat: Hexan, so dass der Boden des Glases gerade noch bedeckt ist. Schließen Sie den Deckel auf dem Glas, sonst verdunstet das Lösungsmittel schnell und Sie müssen mehr hinzufügen.
    • Im allgemeinen sollte ein Lösungsmittel- oder Lösungsmittelgemisch mit niedrigerer Polarität, das mit einer guten Trennung vereinbar ist, verwendet werden.
  4. 4 Bereiten Sie Ihre Lösungen vor. Nehmen Sie das Ausgangsmaterial für Ihre Reaktion und verdünnen Sie es in einer kleinen Durchstechflasche mit Ethylacetat. TLC ist sehr empfindlich und sogar eine 1% ige Lösung Ihrer Verbindung ist reichlich vorhanden. Sie brauchen wirklich nur eine sehr verdünnte Lösung für dieses Verfahren. In der Tat, wenn Ihre Lösung zu konzentriert ist, werden Ihre Flecken Streifen und Sie werden keine nützliche Informationen von Ihrer DC-Platte erhalten. Wenn Ihre Reaktion auch eine nette Lösung ist, können Sie direkt davon unterscheiden, aber wenn Ihre Reaktionsmischung komplexer ist, müssen Sie möglicherweise eine kleine Menge entfernen und in einem geeigneten Lösungsmittel (wie Ethylacetat) verdünnen, um eine Lösung zu erhalten Die besten Lösungen, um zu sehen, sind klar, aber sie müssen nicht sein. Die Farbe der Lösung spielt keine Rolle. Im obigen Bild ist die Lösung klar und farblos, da diese Verbindung nicht gefärbt ist, aber oft haben die Lösungen eine Farbe.
  5. 5 Nehmen Sie eine kleine Menge Lösung. Tauchen Sie die Spitze einer Glaspipette in eine der Reaktionslösungen, die Sie gerade hergestellt haben, und die Pipette saugt eine kleine Menge auf. Dies wird Kapillarwirkung genannt und viele Menschen sind überrascht, dass dies funktioniert. Sehen Sie das obige Bild für den Beweis, dass das tatsächlich funktioniert. Stecken Sie einfach das Ende der Pipette in die Flüssigkeit, und etwas davon wird in die Pipette kommen. Sie brauchen nicht viel Lösung, um auf der Platte zu erkennen, also ist die Spitze einer Pipette reichlich.
  6. 6 Drücken Sie leicht die Spitze der Pipette bis zum Schnittpunkt einer der gestrichelten Linien und der horizontalen Linie, die Sie zuvor auf der Silica-Seite gemacht haben. Dadurch wird die Lösung in der Pipette auf die Silica aufgesaugt, was zu einem kleinen Lösungsmittelkreis führt und Verbindung. Es ist sehr wichtig, leicht zu erkennen. Wenn Sie zu stark drücken, deponieren Sie zu viel Material, wodurch große Flecken entstehen, die sich überlappen, was dazu führt, dass die TLC schwer zu lesen ist. Dieser Schritt erfordert Übung, also sollten Sie dies mehrmals versuchen und versuchen, so wenig Punkte wie möglich zu erhalten, bevor Sie mit dem nächsten Schritt fortfahren.
    • Finde das Ausgangsmaterial auf dem ersten und zweiten Bindestrich und die Reaktionslösung auf dem zweiten und dritten Bindestrich. Der erste Strich ist Ihre Ausgangsmaterialreferenz (SM), der mittlere Fleck ist ein Co-Fleck (C) und der dritte Fleck ist die Reaktionsreferenz (R). Diese Art von Spotting macht die entwickelte Platte sehr gut lesbar. Das obige Bild zur optischen Verdeutlichung.
  7. 7 Trockne die DC-Platte. Stellen Sie einfach die Platte ab und warten Sie eine Minute, bis das Lösungsmittel von der Platte verdunstet ist. Sie können die Platte nicht laufen lassen, wenn noch Lösungsmittel vorhanden ist.Sie können einen nassen Fleck auf der Platte sehen, wenn Lösungsmittel vorhanden ist. Sie müssen nicht lange auf solche flüchtigen Lösungsmittel wie Ethylacetat und Hexan warten. Eine Minute ist mehr als genug Zeit, um diese Lösungsmittel zu verdampfen.
  8. 8 Entwickle die Platte. Setzen Sie die DC-Platte mit einer Pinzette vorsichtig in das Lösungsmittelgefäß, wobei sich das beschmutzte Ende der Platte am Boden in der Nähe des Lösungsmittels befindet. Tauchen Sie die untere Kante der Platte in das Lösungsmittel ein und lassen Sie das Lösungsmittel die Platte hinauflaufen, wobei Sie die Verbindungen mit sich führen. Bedecke das Glas mit dem Deckel. Dies verhindert, dass Lösungsmittel verdampft und die Entwicklungsstufe viel schneller macht.
  9. 9Lassen Sie das Glas / System ungestört, sonst wird das Band verzerrt.
  10. 10 Dies ist die Phase, in der die Trennung stattfindet. Seien Sie also geduldig und warten Sie 2-3 Minuten, bis das Lösungsmittel die Spitze der Platte erreicht hat, bevor Sie es entfernen. Ein längeres Warten liefert normalerweise bessere Ergebnisse, solange Sie das Lösungsmittel nicht über die obere Kante hinaus fließen lassen.
  11. 11 Entfernen Sie die Platte. Sobald das Lösungsmittel fast bis zur Oberkante der Platte reicht, entfernen Sie es vorsichtig mit einer Pinzette aus der Kammer. Markieren Sie schnell den höchsten Punkt, den das Lösungsmittel erreicht hat. Dies wird als Lösungsmittelfront bezeichnet und ist wichtig für spätere Berechnungen. Berühren Sie die Kieselsäure nicht mit den Fingern, da Sie die Flecken verschmieren oder Verbindungen von Ihren Händen auf die Platte auftragen können, wodurch Ihre Platte unbrauchbar wird.
  12. 12 Trocknen Sie die Platte. Warten Sie erneut, bis das Lösungsmittel von der Platte verdampft ist. Dies sollte nur eine Minute oder weniger dauern, wenn Sie ein flüchtiges Lösungsmittel wie Ethylacetat Hexan verwenden, aber es ist wichtig, kein Lösungsmittel auf Ihrem Teller zu haben.
  13. 13Visualisieren Sie die Platte.
  14. 14 Legen Sie die Platte unter ein ultraviolettes Licht. Sie sollten mehrere Stellen an verschiedenen Stellen bemerken, die verschiedenen Verbindungen entsprechen. Das Vorhandensein oder Fehlen von Flecken entspricht dem Fortschritt einer Reaktion, so dass Informationen über eine Reaktion auf diese Weise leicht bestimmt werden können. Verwenden Sie einen Bleistift, um die Punkte zu umreißen, damit Sie die Platte weiter analysieren können, nachdem Sie sie aus der UV-Quelle entfernt haben. Schau dir das obige Bild an und bemerke die verschiedenen Spots in verschiedenen Höhen.
  15. 15 Berechnen Sie den Verzögerungsfaktor (Rf). Dies ist einfach das Verhältnis, wie weit sich die Spots bewegt haben und wie weit sich das Lösungsmittel bewegt hat. Messen Sie mit einem Lineal den Abstand zur Lösungsmittelfront und zur Mitte der Spots. Teilen Sie die Entfernung der Punkte um die Entfernung, um die sich das Lösungsmittel bewegt. Dies gibt Ihnen eine Zahl zwischen 0 und 1. Indem Sie den Rf bekannter Verbindungen berechnen, können Sie sie auf einer DC-Platte identifizieren. Verschiedene Verbindungen haben fast immer unterschiedliche Rf-Werte, wodurch sie leicht zu unterscheiden sind.